外泌体miRNA测序测试服务-武汉科锐诺生物(在线咨询)

外泌体分离提取方案。主要方案包括：

1、差速超1速离心法；

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；

2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法；

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；

3、超滤提取法；

适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，做进一步的提取。

外泌体是细胞外囊泡的一种，外泌体miRNA测序测试服务，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、NTA检测（粒径及浓度鉴定）、WB（分子标志物）。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好，纯度较高的外泌体样品，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。

外泌体可通过多种小分子进行修饰，因此逐渐成为递送治1疗药1物的有效载体。研究发现，GRP78 在索拉菲尼耐药癌细胞中，相对于索拉菲尼敏感癌细胞中显著过表达，因此，可能是 HCC 治1疗的潜在靶点。

在这项研究中，锦州医学院赵亮课题组通过修饰 BM-MSCs 以表达外泌体 siGRP78，证明了 siGRP78 修饰的外泌体与索拉1非尼联合能够靶向肝细胞癌细胞中的 GRP78 并抑制其生长和体外癌细胞的侵袭。此外，siGRP78 修饰外泌体与索拉1非尼联合也抑制体内癌细胞的生长和转移。证明了 siGRP78 修饰的外泌体可以使索拉1非尼耐药的癌细胞对索拉1非尼敏感并逆转耐药性。

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外泌体是由细胞分泌的纳米级膜性小囊泡，直径约30~150nm。外泌体来源多样，广泛存在并分布于各种生物液体中，富含来源细胞的蛋白质、脂质和核酸，参与细胞间的信息交流。不同病理和生理条件下，外泌体的内容物不尽相同，因此外泌体可以很好地反映生物体的疾病与健康状态。此外，外泌体特殊的膜结构能够保护其内容物如RNA（microRNA、mRNA、lncRNA、circRNA）免受酶的降解，保证其能在各类体液中被稳定检测到，因此外泌体是研究各种疾病的良好生物学材料，可作为肿1瘤潜在的biomarker和治1疗靶点，亦可作为基因/药1物的递送载体，在疾病的诊断和治1疗方面具有广阔的应用前景。

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